Detección y caracterización de Escherichia coli productor de toxina Shiga a partir de casos clínicos y de alimentos en Uruguay / Detection and characterization of Shiga toxin - producing Escherichia coli from clinical cases and food in Uruguay

Establecimos la frecuencia de aislamiento de Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) a partir de muestras clínicas y de alimentos, así como las características fenotípicas y genotípicas de las cepas recuperadas. Se analizaron 198 muestras fecales de niños con diarrea sanguinolenta (DS), 14 muestras fecales de niños con síndrome urémico hemolítico (SUH) y 220 muestras de carne picada. También se estudiaron 4 cepas STEC aisladas de alimentos embutidos. Se recuperó STEC de 3 (1,5%) de los niños con DS, de 1 (7%) niño con SUH y de 4 (1,8%) de las muestras de carne picada. Todas las cepas fueron eae y ehxA positivas. Los serotipos detectados fueron: O157:H7 (9 cepas), O26:H11 (2 cepas), O111:NM (1 cepa) y O145:HNT (1 cepa). Todas las cepas O157:H7 portaron el subtipo eae-g1; las cepas O26:H11 y O145:HNT portaron el subtipo eae-b1 y la cepa O111:NM portó el subtipo eae-g2/q. Las cepas STEC del mismo serogrupo mostraron alta diversidad genética. En Uruguay STEC no sería agente frecuente de diarrea con sangre en niños. Sin embargo, las cepas recuperadas presentaron los genes asociados con enfermedad severa y 2 de los 3 niños infectados con STEC evolucionaron a SUH. La carne picada y otros alimentos serían vehículos importantes de O157:H7.

We have assessed the frequency of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) in clinical and food samples as well as studied the genotypic and phenotypic characteristics of the recovered strains. One hundred ninety eight fecal samples from children with bloody diarrhea (BD), 14 from children with hemolytic uremic syndrome (HUS), 220 ground beef samples and 4 STEC isolates from other beef-derived products were analyzed. The STEC strains were isolated from 3 (1.5%) children with bloody diarrhea, 1 (7%) from a child with HUS and 4 (1.8%) from ground beef samples. All strains were eae and ehxA positive. The serotypes found were: O157:H7 (9 strains), O26:H11 (2), O111: NM (1) and O145:HNT (1). All O157:H7 STEC strains harbored the eae subtype g1, O26:H11 and O145:HNT strains, subtype b1 and O111:NM strain, subtype g2/q. The STEC strains of the same serogroup showed high genetic diversity. In Uruguay, STEC is not frequently isolated from cases of bloody diarrhea in children. However, all the recovered STEC strains carried the genes associated with severe disease and 2 out of 3 children infected with STEC developed HUS. Ground beef and other food products might be important vehicles for O157:H7 strains.

Comparative molecular study of Mycobacterium tuberculosis strains, in times of antimicrobial drug resistance / Estudio molecular comparativo de cepas de Mycobacterium tuberculosis, en tiempos de resistencia antimicrobiana a los fármacos

Strains of Mycobacterium tuberculosis were compared using two DNA fingerprinting techniques: Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) and Double-Repetitive-Element-PCR (DRE-PCR). Two of these strains: IH1 (susceptible to isoniazid) and IH2 (resistant to isoniazid) were recovered from cases of pulmonary tuberculosis which occurred in two brothers who lived together. The first one was recognized on July 1999, and the second was diagnosed one year later. IH1 and IH2 showed the same pattern of bands with both molecular tests. These results suggest that single drug chemoprophylaxis may occasionally select resistant strains for that drug, which can eventually cause disease and be recognized through these tests. Strains IH3, IH4 and IH5 were obtained from sputum samples of 3 different patients, and intra-laboratory cross-contamination was suspected when it was realized that the 3 positive materials had been consecutively processed the same day by the same worker in the same biological safety cabinet. Again, the 3 strains revealed identical band patterns with RFLP and DRE-PCR, confirming the posed suspicion. The results with DRE-PCR were obtained after only 8 hours of work, without the need for subcultures. This procedure allows quick correction of treatment conducts, avoiding unnecessary exposure of people and bacteria to antimicrobial drugs.

Se compararon cepas de Mycobacterium tuberculosis utilizando 2 procedimientos de ADN fingerprinting: polimorfismo de los fragmentos de restricción (RFLP) y Double-Repetitive-Element-PCR (DRE-PCR). Dos de las cepas: IH1 (susceptible a isoniazida) e IH2 (resistente a isoniazida) se recuperaron a partir de casos de tuberculosis pulmonar que ocurrieron en dos hermanos convivientes. La primera fue aislada en julio de 1999 y la segunda un año después. IH1 e IH2 mostraron el mismo patrón de bandas por ambos procedimientos. Estos resultados sugieren que la quimioprofilaxis con una sola droga puede ocasionalmente seleccionar mutantes resistentes, las cuales pueden causar enfermedad y ser reconocidas por estos procedimientos. Las cepas IH3, IH4 e IH5 fueron aisladas de 3 pacientes diferentes, y examinadas por probable contaminación cruzada dentro del laboratorio ya que fueron procesadas el mismo día, por el mismo operador y en la misma cabina de seguridad biológica. Nuevamente, las 3 cepas revelaron el mismo patrón de bandas por RFLP y por DRE-PCR, confirmando la sospecha. Los resultados de la DRE-PCR se obtuvieron luego de 8 horas de trabajo, sin necesidad de subcultivos. Esta técnica permitiría la rápida correción de pautas de tratamiento, evitando la exposición innecesaria de personas y bacterias a drogas antimicrobianas.

Serotipos, perfil plasmídico y antibiotipos de cepas de Shigella flexneri aisladas de niños menores de 5 años con diarrea sanguinolenta usuarios de los servicios de Salud Pública / Serotypes, serum profile and anti-biotypes of Shigella flexneri cultures isolated from infants under 5 years with diarrhea sanguinolenta users of Public Health Services

Introducción: en niños menores de 5 años con diarrea sanguinolenta, Shigella flexneri es el agente bacteriano más frecuentemente recuperado en nuestro medio. La shigellosis es una de las enfermedades infecciosas en las cuales el tratamiento con antimicrobianos es efectivo. La elección empírica del antimicrobiano adecuado es problemática debido a la resistencia de Shigella a diversos antibióticos. Esta situación estimuló el interés en el desarrollo de vacunas para el control de esta enfermedad. Debido a que algunas vacunas están orientadas a promover la respuesta inmune serotipo específica, es importante establecer la distribución de los serotipos prevalentes en la población que interesa inmunizar. El objetivo de este estudio fue caracterizar 50 cepas de Shigella flexneri aisladas a partir de niños con diarrea sanguinolenta, recuperadas en 4 encuestas etiológicas de gastroenteritis. Método: a cada una se le realizó: serotipificación, estudio del patrón de lipopolisacárido, perfil plasmídico y estudio de sensibilidad a diferentes antimicrobianos. Resultados: los seroptipos prevalentes fueron 2a, 3c, 4, 6, y 1. Se identificaron 10 antibotipos diferentes. En los cultivos del serotipo 2a se hallaron 3 patrones plasmídicos; el 5 fue el más frecuente, seguido por el 6 y el 7. El análisis de la evolución de los antibiotipos circulantes mostró una tendencia hacia la aparición de tipos con mayor espectro de resistencia. Conclusiones: vista esta evolución, y de acuerdo a los resultados obtenidos, resulta de interés ensayar un inmunógeno que incluya los determinantes "O" específicos de los serotipor 2a, 1, 3c, 4, 6 y el de Shigella sonnei.

Primer aislamiento en Uruguay de Escherichia Coli, productora de toxina Shiga del serotipo O157: H7 en una niña con síndrome urémico hemolítico / First Uruguayan isolation of Shiga toxin-producing Escherichia coli O157: H7 in female infant with hemolytic syndrome

En mayo de 2002 se aisló por primera vez en Uruguay Escherichia coli O157:H7, productora de toxina shiga a partir del coproductivo de una niña de 16 meses procedente de Melo, con diagnóstico de síndrome urémico hemolítico. La cepa, productora de toxinas shiga tipo 2 y tipo 2 variante humana a, era genéticamente distinta de las cepas circulantes en Argentina.